IAP,豬免疫抑制酸性蛋白ELISA試劑盒技術指導

l 本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織、細胞上清及相關液體樣本中豬免疫抑制酸性蛋白（IAP）的含量。

l 有效期：6個月

l 保存條件：2-8℃

l 本試劑盒僅供體外研究使用，不用于臨床診斷

實驗原理

試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被豬免疫抑制酸性蛋白（IAP）捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的豬免疫抑制酸性蛋白（IAP）呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。

標本要求

1. 血清：溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。

2. 血漿：根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或其他作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。

3. 尿液：無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。

4. 細胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。

5. 組織標本：切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐３?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4)，或組織蛋白萃取試劑，用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。

問題解答

Elisa試劑盒陰性對照及陽性對照解析

Elisa試劑盒陰性對照及陽性對照：陰、陽性對照若有正確的結(jié)果，對試劑盒操作的結(jié)果可以有粗略的判斷。

空白對照：對ELISA試劑來說，空白對照實際上是不加標本不加酶做對照。空白對照主要測系統(tǒng)的吸光率。空白對照在單波長測量時顯得尤其重要

我司代理幾千種ELISA試劑盒，數(shù)萬種抗體，并代理產(chǎn)品近萬種，涉及分子生物學、分子免疫學、細胞生物學等生命科學研究的各個領域。為了節(jié)省您的時間，我們還可以提供代檢測服務。

注意事項

1. 由于底物顯色劑對光及其敏感，因此要避光保存。

2. 檢測吸光度前應將酶標儀打開，將其預熱30min以上。

3. 孵育的時間應該嚴格按照試劑盒說明書上的時間為準。

4. 要盡量做雙孔實驗，這樣才既能保證數(shù)據(jù)的準確性，又能反映出試劑盒的精密度。

5. 對樣本的結(jié)果有疑問時需要使用其他檢測方法進行驗證。

代測服務

客戶以快遞形式送標本，上海市內(nèi)客戶代測樣本可享我司上門取樣服務。

本公司公布的試劑盒，可以提供代測服務。

本公司上尚未列出的試劑盒，可以代為研發(fā)和測定，費用等相關信息咨詢。