ELISA應(yīng)用領(lǐng)域

【產(chǎn)品名稱】：CA-9,大鼠碳酸酐酶9ELISA試劑盒技術(shù)指導(dǎo)

【檢測方法】：酶聯(lián)免疫法/酶免法(ELISA)

【產(chǎn)品性狀】：96T/48T，盒裝液體

【貯藏】：2-8°C

【產(chǎn)品有效期】：二年，我公司Elisa試劑盒均為批次，可放心購買。

【產(chǎn)品主要成分】：酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等。

【標(biāo)本】：血清/血漿/細(xì)胞培養(yǎng)上清液/組織勻漿/組織液/尿液/分泌物

【質(zhì)量承諾】：我們堅(jiān)持對產(chǎn)品質(zhì)量作不斷的評估、創(chuàng)新和改善以確保您對我們產(chǎn)品的高度信任。

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CA-9,大鼠碳酸酐酶9ELISA試劑盒技術(shù)指導(dǎo)操作方法

競爭法可用于測定抗原，也可用于測定抗體。以測定抗原為例，受檢抗原和酶標(biāo)抗原競爭與固相抗體結(jié)合，因此結(jié)合于固相的酶標(biāo)抗原量與受檢抗原的量成反比。操作步驟如下：

(1)將特異抗體與固相載體連接，形成固相抗體。洗滌。

(2)待測管中加受檢標(biāo)本和一定量酶標(biāo)抗原的混合溶液，使之與固相抗體反應(yīng)。如受檢標(biāo)本中無抗原，則酶標(biāo)抗原能順利地與固相抗體結(jié)合。如受檢標(biāo)本中含有抗原，則與酶標(biāo)抗原以同樣的機(jī)會(huì)與固相抗體結(jié)合，競爭性地占去了酶標(biāo)抗原與固相載體結(jié)合的機(jī)會(huì)，使酶標(biāo)抗原與固相載體的結(jié)合量減少。參考管中只加酶標(biāo)抗原，保溫后，酶標(biāo)抗原與固相抗體的結(jié)合可達(dá)充分的量。洗滌。

(3)加底物顯色：參考管中由于結(jié)合的酶標(biāo)抗原多，故顏色深。參考管顏色深度與待測管顏色深度之差，代表受檢標(biāo)本抗原的量。待測管顏色越淡，表示標(biāo)本中抗原含量越多。

ELISA間接法、競爭法、捕獲法，應(yīng)用親和素和生物素的ELISA

親和素是一種糖蛋白，可由蛋清中提取。分子量60kD，每個(gè)分子由4個(gè)亞基組成，可以和4個(gè)生物素分子親密結(jié)合。現(xiàn)在使用更多的是從鏈霉菌中提取的鏈霉親和素。生物素又稱維生素H，分子量244.31，存在于蛋黃中。用化學(xué)方法制成的衍生物，生物素-羥 基琥珀亞胺酯(BNHS)可與蛋白質(zhì)、糖類和酶等多種類型的大小分子形成生物素化的產(chǎn)物。親和素與生物素的結(jié)合，雖不屬免疫反應(yīng)，但特異性強(qiáng)，親和力大，兩者一經(jīng)結(jié)合就極為穩(wěn)定。由于1個(gè)親和素分子有4個(gè)生物素分子的結(jié)合位置，可以連接更多的生物素化的分子，形成一種類似晶格的復(fù)合體。因此把親和素和生物素與ELISA偶聯(lián)起來，就可大大提高ELISA的敏感度。